Vajinal Lavaj ve Yayma (Smear) Yöntemi

Bu çalışma, ratlarda vajinal lavaj ve yayma (smear) yöntemlerinin protokolünü detaylı bir şekilde açıklamaktadır. Vajinal lavaj işlemi için steril pipet ucu, insülin enjektörü, pastör pipeti veya pamuk uçlu sürüntü kullanılabilir; sıvı olarak ise 100-200 µl otoklavlanmış distile su (ddH2O) veya serum fizyolojik (SF) tercih edilir. Uygulama sırasında rat kafesten alınarak düz bir zemine yerleştirilir ve kuyruğundan sıkıca kavranarak kaldırılır. İdrar yapma durumu varsa beklenmeli, vajinal açıklık gerekirse temizlenmelidir. Yalancı gebeliği indüklememek adına, ddH2O ile doldurulmuş pipet veya enjektör ucu vajinal kanalın derinliğine girmeden, sadece açıklığa yerleştirilmelidir. Yaklaşık 50-100 µl sıvı yavaşça bırakılır, kendiliğinden aspire olan sıvı ardından geri çekilir. Alternatif bir yöntem olarak, SF ile ıslatılmış pamuklu sürüntü vajina duvarında hafifçe döndürülerek hücre toplanabilir ve kuru bir cam slayta aktarılabilir. Toplanan lavaj örneği lama damlatıldıktan sonra, ikinci bir lam 45 derece açıyla tutularak orta hızda ileri doğru kaydırılır ve ince bir yayma elde edilir. Hazırlanan bu slaytlar havada kurutulup boyandıktan sonra mikroskop altında incelenmeye hazır hale gelir.

This study details the protocol for vaginal lavage and smear methods in rats. For the vaginal lavage procedure, a sterile pipette tip, insulin syringe, Pasteur pipette, or cotton-tipped swab can be used, with 100-200 µl of autoclaved distilled water (ddH2O) or saline (SF) preferred as the fluid. During the application, the rat is removed from the cage, placed on a flat surface, and lifted by firmly grasping its tail. If urination occurs, one must wait, and the vaginal opening is cleaned if necessary. To avoid inducing pseudopregnancy, the pipette or syringe tip filled with ddH2O should be placed only at the opening of the vaginal canal without entering it deeply. Approximately 50-100 µl of fluid is gently released, and the fluid, which aspirates into the canal spontaneously, is then withdrawn. Alternatively, cells can be collected by gently rotating a cotton swab moistened with SF against the vaginal wall and then transferred to a dry glass slide. After dropping the collected lavage sample onto a slide, a second slide is held at a 45-degree angle and slid forward at medium speed to obtain a thin smear. These prepared slides are ready for microscopic evaluation after being air-dried and stained.