İmmünokimyasal Yöntemler
Özet
İmmünokimyasal yöntemler, klinik laboratuvarlarda hormonlar, serum proteinleri, enfeksiyöz etkenlere veya alerjenlere karşı oluşan antikorlar ve kötüye kullanılan ilaçların analizinde yaygın olarak kullanılan hızlı ve efektif analitik araçlardır. Küçük numune hacimleri (10-100 µL) ile 20-30 dakika gibi kısa sürede sonuç verebilen bu yöntemler, yüksek sensitivite ve spesifite sunarlar. Temel çalışma prensipleri antijen ve antikor arasındaki spesifik bağlanma reaksiyonuna dayanır. Antijen-antikor etkileşiminde hidrofobik ve hidrofilik bağlar ile van der Waals kuvvetleri rol oynar; reaksiyonların gücü afinite ve avidite kavramları ile açıklanır. Bu yöntemlerde poliklonal veya homojen yapıya sahip monoklonal antikor reaktifleri tercih edilmektedir. İmmünokimyasal yöntemler; presipitasyon, parçacık, radyoimmün (RIA), enzim (EIA), floresan (FIA) ve kemilüminesan (KLIA) yöntemler şeklinde işaretleyici türlerine göre sınıflandırılır. Ayrıca çalışma prensiplerine göre yarışmalı (eş zamanlı veya sıralı) ve yarışmasız (sandviç) yöntemler; serbest ve bağlı işaretleyicileri ayırma ihtiyacına göre ise heterojen ve homojen yöntemler olarak ayrılırlar. Günümüzde bu analizler anemi, endokrin, tümör, kardiyovasküler ve diyabet belirteçlerinin saptanması ile terapötik ilaç monitorizasyonu gibi pek çok alanda ticari olarak güvenle uygulanmaktadır.
Referanslar
Turhan T, editor. Tıbbi Laboratuvarda Doğru Sonuç: Hataların Tespiti ve Düzeltilmesi için Rehber. Ankara: Palme Yayıncılık; 2015.
Bishop ML, Fody EP, Schoeff LE, editors. Clinical Chemistry Techniques, Principles, Correlations. 6th ed. Philadelphia, USA: Lippincott Williams & Wilkins; 2010.
Kohler G, Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nature. 1975;256(5517):495-7.
McPherson RA, Pincus MR, editors. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 22nd ed. Philadelphia,USA: Elsevier Saunders; 2011.
Komissarenko SV, Avrameas S. [Properties of immunoadsorbents prepared by antigen coupling to glutaraldehydeactivated polyacrylamide gel, BrCN-activated Sepharose and by copolymerization of antigens by glutaraldehyde]. Ukrainskii biokhimicheskii zhurnal. 1978;50(4):500-11.
Nakane PK, Pierce GB, Jr. Enzyme-labeled antibodies: preparation and application for the localization of antigens. The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society. 1966;14(12):929-31.
Kitagawa T, Fujitake T, Taniyama H, Aikawa T. Enzyme immunoassay of viomycin. New cross-linking reagent for enzyme labelling and a preparation method for antiserum to viomycin. Journal of biochemistry. 1978;83(5):1493-501.
Yalow RS. The effects of alpha-particle irradiation on I 131-labeled iodotyrosines. Radiation research. 1959;11(1):30-7.
Engvall E, Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G. Immunochemistry. 1971;8(9):871-4.
van Weeman BK, Schuurs AH. The influence of heterologous combinations of antiserum and enzyme-labeled estrogen on the characteristics of estrogen enzyme-immunoassays. Immunochemistry. 1975;12(8):667-70.
Thorpe SJ, Feizi T. Species differences in the expression of carbohydrate differentiation antigens on mammalian blood cells revealed by immunofluorescence with monoclonal antibodies. Bioscience reports. 1984;4(8):673-85.
Baeyens WR, Schulman SG, Calokerinos AC, Zhao Y, Garcia Campana AM, Nakashima K, et al. Chemiluminescence-based detection: principles and analytical applications in flowing streams and in immunoassays. Journal of pharmaceutical and biomedical analysis. 1998;17(6-7):941-53.
Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4th ed. Philadelphia,USA: Elsevier Saunders; 2006.
